by Serology Test in Hindi | सीरोलॉजी टेस्ट वह टेस्ट होते हैं जो किसी व्यक्ति के शरीर में विशिष्ट रोगाणुओं के खिलाफ एंटीजन या एंटीबॉडी की उपस्थिति को देखने के लिए किए जाते हैं.
सेरोलॉजी शब्द “सीरम” शब्द से आया है जो ब्लड का लिक्विड पार्ट है जो फाइब्रिनोजेन (fibrinogen) (थक्के लगाने वाला प्रोटीन) को हटाने के बाद बचा रहता है.
हालांकि सीरोलॉजी टेस्ट आमतौर पर ब्लड सैंपल पर किए जाते हैं, कभी-कभी इन परीक्षणों के लिए मूत्र और मस्तिष्कमेरु द्रव (cerebrospinal fluid) सहित अन्य तरल पदार्थों का भी उपयोग किया जाता है.
एंटीजन किसी भी बाहरी पदार्थ होते हैं जिनमें सूक्ष्मजीव (microorganisms), माइक्रोबियल विषाक्त पदार्थ (microbial toxins), धूल और एलर्जेंस शामिल हैं. कभी-कभी शरीर अपनी स्वस्थ सेल्स को एंटीजन के रूप में देखना शुरू कर देता है – इसका परिणाम ऑटोइम्यून बीमारियों (autoimmune diseases) होता है. एंटीबॉडीज प्रोटीन होते हैं जो हमारी प्रतिरक्षा प्रणाली एंटीजन से लड़ने और उन्हें शरीर से खत्म करने के लिए बनाती है.
परीक्षण (एंटीजन या एंटीबॉडी) और कैसे किया जा रहा है, इस पर निर्भर करते हुए विभिन्न प्रकार के सीरोलॉजी टेस्ट होते हैं.
सीरोलॉजी टेस्ट, विशेष रूप से एंटीबॉडी टेस्ट, स्पर्शोन्मुख (asymptomatic) COVID-19 मामलों का पता लगाने के लिए व्यापक रूप से उपयोग किए जा रहे हैं और स्वस्थ प्लाज्मा थेरेपी के लिए उम्मीदवारों की तलाश कर रहे हैं – जहां रोग के प्रबंधन के लिए एक सक्रिय संक्रमण वाले व्यक्ति को एक बरामद रोगी (recovered patient) से एंटीबॉडी स्थानांतरित किया जाता है.
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एंटीबॉडी के प्रकार और प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया – Types of antibodies and immune response
जब भी आपकी प्रतिरक्षा प्रणाली एक नए रोगज़नक़ (बैक्टीरिया, वायरस, फंगस, आदि) के संपर्क में आती है, तो यह विशिष्ट एंटीबॉडी (immunoglobulin) बनाता है जो उक्त सूक्ष्म जीव को लक्षित करता है.
मानव शरीर में पांच अलग-अलग प्रकार के एंटीबॉडी होते हैं-
- IgA,
- IgG,
- IgM,
- IgE,
- IgD
ये सभी एंटीबॉडी Y आकार के प्रोटीन कॉम्प्लेक्स हैं जिनमें दो भारी चेन (heavy chain) और दो लाइट चेन (light chain) होते हैं.
सभी चार श्रृंखलाओं में एक गैर-परिवर्तनशील क्षेत्र (non-changing field) (Fc क्षेत्र) और एक चर क्षेत्र (Fab क्षेत्र) होता है.
उत्तरार्द्ध वह है जो एंटीबॉडी विभिन्न एंटीजन के साथ पहचानने और बाँधने के लिए उपयोग करते हैं.
यह चर प्रतिजनों (variable antigens) के लिए अत्यधिक विशिष्ट है लेकिन कभी-कभी एक एंटीजन के लिए एक एंटीबाडीज अन्य एंटीजन के साथ क्रॉस-प्रतिक्रिया (cross-reaction) कर सकता है. ऐसा तब होता है जब दो एंटीजन की संरचना समान होती है.
दूसरे शब्दों में, यदि दो अलग-अलग बीमारियों का कारण बनने वाले रोगाणु बहुत समान हैं, तो वही एंटीबॉडी दोनों के खिलाफ प्रभावी हो सकते हैं.
IgM एंटीबॉडी संक्रमण के समय बनने वाला पहला एंटीबॉडी है. हालांकि, आईजीजी एंटीबॉडी (IgG antibodies) सबसे आम एंटीबॉडी है और दीर्घकालिक प्रतिरक्षा (long term immunity) के लिए जिम्मेदार है.
संक्रमण समाप्त होने के बाद भी एंटीबॉडी आपके रक्त में रहते हैं. इसलिए एक सीरोलॉजी टेस्ट का उपयोग यह निर्धारित करने के लिए किया जा सकता है कि क्या आप माइक्रोब (microbe) के संपर्क में आए हैं – या तो हाल ही में या अतीत में.
इन परीक्षणों का उपयोग ऑटोइम्यून बीमारियों (autoimmune diseases) की तलाश के लिए भी किया जा सकता है – ऐसी स्थितियाँ जिनमें आपकी प्रतिरक्षा प्रणाली गलती से आपके शरीर में स्वस्थ सेल के खिलाफ एंटीबॉडी बनाना शुरू कर देती है.
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सीरोलॉजी टेस्ट के प्रकार – Types of Serology Tests in Hindi
सीरोलॉजिकल टेस्ट, एंटीजन-एंटीबॉडी प्रतिक्रियाओं (antigen-antibody reactions) पर निर्भर करते हैं.
जब कोई एंटीबॉडी किसी विशेष एंटीजन की पहचान करता है, तो यह एंटीजन को बेअसर करने के लिए बांधता है और इस प्रतिक्रिया को प्रयोगशाला में प्रेसिपीटशन (precipitation), अग्गलउटिनाशन (agglutination) या रंग विकास (color development) जैसे विभिन्न तरीकों से देखा जा सकता है.
प्रेसिपीटशन (precipitation) में, कुछ को बसते हुए देखा जा सकता है. एग्लूटिनेशन में कणों को आपस में चिपकते हुए देखा जा सकता है, और रंग के विकास में, परीक्षण के परिणाम रंग परिवर्तन (या इसकी अनुपस्थिति) द्वारा निर्धारित किए जाते हैं.
एक नमूने में क्या देखा जा रहा है (एंटीजन या एंटीबॉडी) के आधार पर, सीरोलॉजी परीक्षण दो प्रकार के होते हैं :-
- प्रत्यक्ष सीरोलॉजिकल परीक्षण – Direct Serological Test
ये परीक्षण रोगी के ब्लड / शरीर के तरल पदार्थ में एंटीजन की उपस्थिति को देखने के लिए एक एंटीसेरम (antiserum) (एक एंटीजन या रोगज़नक़ के खिलाफ एंटीबॉडी के साथ सीरम) का उपयोग करते हैं. तो, मान लीजिए, आप किसी व्यक्ति के ब्लड में वायरस ए (virus a) की तलाश कर रहे हैं, तो आप एंटी-ए एंटीबॉडी (anti-A antibody) वाले एंटीसेरम का उपयोग करते हैं. एंटीजन-एंटीबॉडी प्रतिक्रिया तब होगी जब दिए गए नमूने में वायरस ए मौजूद होता है.
- अप्रत्यक्ष सीरोलॉजिकल परीक्षण – Indirect Serological Test
ये परीक्षण रोगी के सीरम में एंटीबॉडी की उपस्थिति की तलाश करते हैं. इस परीक्षण में, रोगी के सीरम को प्रयोगशाला में एक निश्चित एंटीजन (specific antigen) के संपर्क में लाया जाता है – प्रतिक्रिया केवल तभी होगी जब रोगी के सीरम में एंटीजन के खिलाफ विशिष्ट एंटीबॉडी हों.
सीरोलॉजी टेस्ट क्यों किए जाते हैं? – Why are serology tests done in Hindi?
सीरोलॉजी टेस्ट किसी व्यक्ति के ब्लड या शरीर के तरल पदार्थ में एक विशिष्ट एंटीजन या एंटीबॉडी की उपस्थिति की पहचान करने के लिए किया जाता है. इन परीक्षणों का उपयोग विभिन्न संक्रामक रोगों का पता लगाने के लिए किया जा सकता है, जिनमें शामिल हैं :-
- क्लैमाइडिया (chlamydia), टाइफाइड (typhoid) और सिफलिस (Syphilis) जैसे जीवाणु संक्रमण.
- फंगल इन्फेक्शन (fungal infection) जैसे कोसिडिओडोमाइकोसिस (coccidioidomycosis) (वैली फीवर), यीस्ट इन्फेक्शन आदि.
- डेंगू, खसरा, फ्लू और एचआईवी/एड्स जैसे वायरल संक्रमण.
- परजीवी संक्रमण (parasitic infection) जैसे अमीबायसिस (amebiasis) और फाइलेरिया (filariasis).
सीरोलॉजिकल टेस्ट का उपयोग आईजीई एंटीबॉडी की उपस्थिति को देखने के लिए भी किया जा सकता है, जो किसी व्यक्ति के खून में एलर्जी प्रतिक्रिया या परजीवी संक्रमण (parasitic infection) होने पर बड़ी संख्या में पाए जाते हैं.
ऑटोइम्यून बीमारियों (autoimmune diseases) के मामले में, शरीर के कुछ टिस्सुस के खिलाफ विशिष्ट एंटीबॉडी का सीरोलॉजी परीक्षणों से पता लगाया जा सकता है.
उदाहरण के लिए, ल्यूपस (lupus) का पता लगाने के लिए एक एंटी-डीएसडीएनए एंटीबॉडी परीक्षण (Anti-dsDNA Antibody Test) का उपयोग किया जाता है.
एंटी-डीएसडीएनए एंटीबॉडी एक प्रकार के ऑटोएंटिबॉडी (एंटीबॉडी जो शरीर की स्वस्थ सेल्स पर हमला करते हैं) हैं जो हमारी सेल्स के अंदर डीएनए को लक्षित करते हैं.
प्रयोगशाला में सीरोलॉजी के परिणाम कैसे देखे जाते हैं? – How are serology results viewed in the laboratory in Hindi?
इस टेस्ट को करने के लिए लैब टेक्निशियन सबसे पहले आपकी बांह की नस से खून लिया जाता है.
निम्नलिखित कुछ तकनीकें हैं जिनका उपयोग प्रयोगशालाओं में एंटीजन-एंटीबॉडी प्रतिक्रिया की कल्पना करने के लिए किया जाता है :-
प्रेसिपीटशन रिएक्शन – Precipitation Reaction
- प्रेसिपीटशन रिएक्शन में, घुलनशील एंटीजन और एंटीबाडीज एक दूसरे के साथ प्रतिक्रिया करके एक अवक्षेप (precipitate) बनाते हैं जिसे नग्न आंखों से आसानी से देखा जा सकता है. इस पद्धति में जमा या अवक्षेप तभी देखा जाता है जब परीक्षण सकारात्मक होता है.
- एक लिक्विड सलूशन (liquid phase) या एक जेल फेज (gel phase) में अवक्षेपण प्रतिक्रियाएं (precipitation reactions) की किया जा सकता है. पूर्व में, एंटीजन के लिक्विड सलूशन (liquid solution) को एंटीबॉडी समाधान (antibody solution) पर स्तरित किया जाता है – इस पर निर्भर करते हुए कि एंटीजन या एंटीबॉडी की उपस्थिति के लिए रोगी के ब्लड सीरा (blood sera) का टेस्ट किया जा रहा है या नहीं, यह इनमें से किसी एक का स्थान लेगा परतें. दो परतें मिश्रित होंगी और एंटीबॉडी और एंटीजन (यदि वे दोनों मौजूद हैं) निष्क्रिय प्रसार (passive diffusion) के माध्यम से एक दूसरे की ओर यात्रा करेंगे. अवक्षेप (precipitate), यदि कोई हो, तो दो विलयनों के बीच में कहीं दिखाई देगा, जहाँ एंटीजन और एंटीबॉडी समान मात्रा में मौजूद हों (area of equivalence). प्रतिजन या एंटीबॉडी की अधिकता वाले क्षेत्र में कोई अवक्षेप ((precipitate)) दिखाई नहीं देगा, जो अवक्षेप रेखा के ऊपर और नीचे होगा.
- जेल फेज प्रेसिपीटशन (gel phase precipitation) भी एक निष्क्रिय प्रसार विधि है. इसमें एग्रोज जेल (agarose gel) को पेट्री प्लेट (petri plate) में रखा जाता है और जेल में कुएं (well) सामान काट दिए जाते हैं. अब, केंद्रीय कुएं (central well) में, एक एंटीजन या एंटीबॉडी सलूशन (antibody solution) जोड़ा जाता है और विपरीत सलूशन (opposite solution) आसपास के कुओं (wells) में जोड़ा जाता है. सलूशन जेल के माध्यम से यात्रा करेंगे और तुल्यता के क्षेत्र (area of equivalence) में प्रेसिपीटशन की रेखाएँ बनती हैं.
- एक अन्य प्रकार के जेल फेज प्रेसिपीटशन (gel phase precipitation) में, एंटीसेरम को जेल में जमने से पहले जोड़ा जाता है और एंटीजन घोल को खोदे गए वेल्स में डाल दिया जाता है. समतुल्य क्षेत्र (area of equivalence) में कुओं के आसपास प्रेसिपीटशन (precipitation) होती है. बाद वाली विधि को रेडियल इम्युनोडिफ्यूजन (radial immunodiffusion) कहा जाता है और पूर्व को ओचटरलोनी तकनीक (Ochterlony Technique) कहा जाता है. एक अन्य प्रकार की प्रेसिपीटशन इलेक्ट्रोडीफ्यूजन (precipitation electrodiffusion) है. इसमें एंटीजन और एंटीबाडी, मोलेक्युल्स की गति इलेक्ट्रिक करंट के प्रभाव में होती है.
एग्लूटीनेशन रिएक्शन – Agglutination Reaction
- इस तकनीक में, या तो एंटीजन या एंटीबॉडी एक कण जैसे लेटेक्स बीड्स (latex beads), चारकोल पार्टिकल्स (charcoal particles) या रेड ब्लड सेल्स (red blood cells) से बंधे होते हैं और फिर एंटीजन-एंटीबॉडी रिएक्शन को दृश्यमान क्लंप-एग्लूटीनेशन रिएक्शन (clump-agglutination reaction) के गठन के लिए देखा जाता है.
- उदाहरण के लिए, एक एग्लूटिनेशन रिएक्शन में जो लेटेक्स बीड्स का उपयोग करता है और किसी व्यक्ति में एंटीबॉडी की पहचान करने के लिए, एंटीजन लेटेक्स बीड्स से बंधा होता है और फिर इसे रोगी के सीरम के संपर्क में लाया जाता है. यदि दिए गए नमूने में टेस्ट एंटीजन के खिलाफ एंटीबॉडी हैं तो दिखाई देने वाला क्लंपिंग (clumping) होगा.
- एग्लूटिनेशन प्रतिक्रिया के लिए, पूरे बैक्टीरिया (या अन्य रोगजनकों) को एंटीजन के रूप में भी इस्तेमाल किया जा सकता है. इसे तब प्रत्यक्ष समूहन (direct grouping) कहा जाता है. रोगी के सीरम में एंटीबॉडी (यदि मौजूद हैं) बैक्टीरिया पर हमला करते हैं और गुच्छों (bunches) का निर्माण करते हैं.
- ग्रुप रिएक्शंस प्रेसिपीटशन, प्रेसिपीटशन की तुलना में अधिक संवेदनशील होती हैं. एक परीक्षण की संवेदनशीलता उन लोगों की सही पहचान करने की क्षमता को संदर्भित करती है जिनके पास विशेष संक्रमण के लिए परीक्षण किया जा रहा है – मूल रूप से, परीक्षण अधिक वास्तविक सकारात्मक और कम फाल्स नेगटिवेस देता है.
इम्यूनोऐसेज़ – Immunoassays
इम्यूनोऐसेज़ किसी दिए गए नमूने में मौजूद एंटीजन या एंटीबॉडी की मात्रा निर्धारित करने के लिए एंटीजन-एंटीबॉडी प्रतिक्रियाओं का उपयोग करते हैं. निम्नलिखित कुछ प्रकार के इम्यूनोऐसेज़ टेस्ट हैं :-
- एलिसा – ELISA :- एंटीजन-एंटीबॉडी प्रतिक्रिया होने पर रंग उत्पन्न करने के लिए एंजाइम-लिंक्ड इम्यूनोसॉर्बेंट ऐसे (ELISA) एक एंजाइम का उपयोग करता है. यह एंजाइम या तो एंटीजन या एंटीबॉडी से जुड़ा होता है, यह इस बात पर निर्भर करता है कि अज्ञात नमूने में क्या जांच की जानी चाहिए. एलिसा के लिए उपयोग किए जाने वाले कुछ एंजाइमों में एल्कलाइन फोस्फेटासे (alkaline phosphatase) और हॉर्सरैडिश पेरोक्सीडेज (horseradish peroxidase) हैं.
एक एंटीबॉडी की तलाश के लिए एलिसा परीक्षण (ELISA Test) कैसे किया जाता है?
एक ठोस-फेज जैसे कि एक माइक्रोटिटर प्लेट (microtiter plate) का उपयोग किया जाता है, जिसमें विशिष्ट एंटीजन (जिसके खिलाफ एंटीबॉडी की जांच करने की आवश्यकता होती है) जुड़ा होता है. फिर मरीज के सीरम को एग्रोस जेल के वेल (well) में डाल दिया जाता है. यदि वेल (well) में एंटीजन के खिलाफ सीरम में एंटीबॉडी हैं, तो एंटीजन-एंटीबॉडी प्रतिक्रिया होगी. किसी विशिष्ट सलूशन (specific solution) का उपयोग करके किसी भी मुक्त एंटीबॉडी (free antibodies) को प्लेट से धोया जाता है. अब, एक एंजाइम-लिंक्ड एंटीबॉडी (Enzyme-Linked Antibody) को प्लेट में मिलाया जाता है.
यह एंटीबॉडी उस एंटीबॉडी के लिए विशिष्ट है जिसे दिए गए नमूने में पाया जाना चाहिए. यदि पहली एंटीबॉडी प्लेट में है, तो यह दूसरी एंटीबॉडी उससे बंध जाएगी.
सभी अनबाउंड सेकेंडरी एंटीबॉडी (unbound secondary antibody) भी वाश (wash) किये जाते हैं.
अगला, एंजाइम के लिए सब्सट्रेट (substrate) को सलूशन में मिलाया जाता है. एंजाइम सब्सट्रेट (Enzyme Substrate) के साथ प्रतिक्रिया करता है और प्लेट में कोई माध्यमिक एंटीबॉडी छोड़े जाने पर रंग दिखाता है. विशिष्ट उपकरणों द्वारा, रंग की तीव्रता की जाँच की जाती है और एंटीबॉडी का स्तर प्राप्त किया जाता है.
वेस्टर्न ब्लॉटिंग -Western Blotting
वेस्टर्न ब्लॉट, एक अन्य प्रकार का इम्यूनोसे (immunoassay) है जिसका उपयोग किसी दिए गए नमूने में विशिष्ट प्रोटीन की पहचान करने के लिए किया जा सकता है.
इस तकनीक में, एक घोल से प्रोटीन/एंटीजन को पहले विद्युत प्रवाह के प्रभाव में एक पॉलीएक्रिलामाइड जेल (polyacrylamide gel) में अलग किया जाता है. इस जेल से, एंटीजन को एक फिल्टर पेपर (filter paper) में स्थानांतरित कर दिया जाता है, जो एलिसा माइक्रोटिटर प्लेट्स (elisa microtiter plates) की तरह ठोस सतह बन जाता है.
अगला, फिल्टर पेपर एंजाइम से जुड़े एंटीबॉडी के संपर्क में है. और अंत में, एंजाइम के सब्सट्रेट को घोल में मिलाया जाता है. यदि एंटीबाडी, एंटीजन से बंधे होते हैं और धुलते नहीं हैं, तो एंजाइम सब्सट्रेट के साथ प्रतिक्रिया करेगा और रंग उत्पन्न करेगा. रंग की तीव्रता बताती है कि सलूशन में लक्ष्य प्रोटीन (target protein) की कितनी मात्रा मौजूद थी.
इम्यूनोफ्लोरेसेंस – Immunofluorescence
एक नमूने में विशिष्ट एंटीजन की तलाश के लिए इम्यूनोफ्लोरेसेंस का सबसे अधिक उपयोग किया जाता है. इस तकनीक में, एंटीबॉडी को विशिष्ट फ्लोरोसेंट डाइज (fluorescent dyes) के साथ लेबल किया जाता है.
ये एंटीबॉडी एक नमूने में एंटीजन (यदि मौजूद हैं) से जुड़ेंगे. तब एंटीजन-एंटीबॉडी काम्प्लेक्स (antigen-antibody complexes) को एक निश्चित तरंग दैर्ध्य के प्रकाश (wavelength light) के संपर्क में लाया जाता है, जिस पर वे प्रतिदीप्ति (fluorescence) दिखाते हैं , जिसे रंगीन प्रकाश के रूप में देखा जा सकता है.
उदाहरण के लिए, फ्लोरेसिन (fluorescein), एक डाई, जब नीली रोशनी के संपर्क में आती है, तो पीले-हरे रंग की प्रतिदीप्ति (fluorescence) का उत्सर्जन करती है. यह विधि, एंटीजन की मात्रा निर्धारित नहीं करती है. हालांकि, इम्यूनोफ्लोरेसेंस की एक अधिक आधुनिक और स्वचालित विधि फ्लोरोसेंस-एक्टिवेटिड सेल सॉर्टर (fluorescence-activated cell sorter) नामक कक्ष का उपयोग करती है. जब इस मशीन के माध्यम से फ्लोरेसेंस लेबल एंटीजन-एंटीबॉडी कॉम्प्लेक्स पास किए जाते हैं, तो यह लेजर बीम को फ्लैश करता है और फ्लोरोसेंस के साथ लेबल किए गए प्रत्येक सेल को गिनता है.
COVID-19 के लिए सीरोलॉजी परीक्षण – Serology Testing for COVID-19
वर्तमान में, किसी व्यक्ति के रक्त में SARS-CoV-2 कोरोनावायरस के खिलाफ एंटीबॉडी की उपस्थिति देखने के लिए COVID-19 के लिए सीरोलॉजिकल परीक्षण किया जाता है . SARS-CoV-2 या गंभीर एक्यूट रेस्पिरेटरी सिंड्रोम (acute respiratory syndrome) कोरोनावायरस 2 रोगज़नक़ (Pathogen) है जो COVID-19 का कारण बनता है.
आपको एंटीबॉडी परीक्षण करवाने के लिए कहा जा सकता है यदि :-
- आप एक स्वास्थ्य लाभ (ठीक होने वाले) रोगी हैं और एंटीबॉडी युक्त प्लाज्मा के लिए एक संभावित डोनर हैं.
- यदि आपके चिकित्सक को लगता है कि आप अतीत में वायरस के संपर्क में आ चुके हैं और हो सकता है कि आपको यह बीमारी हो गई हो लेकिन तब आपका टेस्ट नहीं किया गया था.
- यदि आपको आरटी-पीसीआर परीक्षण में नकारात्मक परिणाम मिला है और आपका चिकित्सक अभी भी पुष्टि करना चाहता है कि आपको संक्रमण हुआ है या नहीं.
- यदि आप अतीत में COVID-19 के लिए सकारात्मक परीक्षण नहीं किए गए थे और फिर भी एंटीबॉडी की उपस्थिति दिखाते हैं, तो इसका मतलब है कि आप पहले ही वायरस के संपर्क में आ चुके हैं.
हालांकि, यह अभी भी अज्ञात है कि एंटीबॉडी विकसित होने के बाद कोई व्यक्ति वायरस से प्रतिरक्षित (immune) हो जाता है या नहीं.
एंटीबॉडी परीक्षणों के प्रकार – Types of Antibody Tests
यूएस सेंटर फॉर डिसीज कंट्रोल एंड प्रिवेंशन के अनुसार, एंटीबॉडी टेस्ट दो प्रकार के होते हैं – वे जो बाध्यकारी एंटीबॉडी (binding antibodies) की तलाश करते हैं और वे जो एंटीबॉडी को बेअसर (neutralizing antibodies) करने की तलाश करते हैं.
यहां बताया गया है कि इन परीक्षणों में क्या शामिल है :-
बॉन्डिंग एंटीबाडी टेस्ट – Bonding Antibody Test
बाध्यकारी एंटीबॉडी वे होते हैं जो वायरस या एंटीजन से जुड़ते हैं लेकिन जरूरी नहीं कि वायरस को बेअसर कर दें. बाध्यकारी एंटीबॉडी खोजने के लिए, SARS-CoV-2 वायरस के शुद्ध प्रोटीन का उपयोग किया जाता है. (संरचनाओं के संदर्भ में, SARS-CoV-2 में सतह पर स्पाइक प्रोटीन के साथ खोल में संलग्न आनुवंशिक सामग्री के रूप में RNA शामिल है- ये स्पाइक प्रोटीन इस परीक्षण में उपयोग किए जाने वाले शुद्ध प्रोटीन के स्रोत हैं.) चूंकि ये परीक्षण लाइव वायरस (live virus) का उपयोग नहीं करते हैं.
वायरस, वे निम्न जैव सुरक्षा स्तरों वाली प्रयोगशालाओं में बनाये जा सकते हैं.
COVID-19 के लिए आमतौर पर ELISA परीक्षण COVID-19 एंटीबॉडी देखने के लिए किया जाता है.
हालाँकि, एंटीबॉडी का पता लगाने के लिए देखभाल (point-of-care) के कुछ बिंदुओं का भी उपयोग किया जाता है. उत्तरार्द्ध, लेटरल फ्लो ऐसे (lateral flow assay) पर आधारित है (एक गर्भावस्था परीक्षण देखभाल (point-of-care) परीक्षण का एक प्रकार है) और रोगी के रक्त की एक छोटी बूंद का उपयोग करके किया जा सकता है.
न्यूट्रलाइजिंग एंटीबॉडी परीक्षण – Neutralizing Antibody Test
न्यूट्रलाइजिंग एंटीबॉडी वे होते हैं जो वास्तव में वायरस को बांधते हैं और इसे बेअसर करते हैं. अब तक, यूएस फूड एंड ड्रग एडमिनिस्ट्रेशन (FDA) ने COVID-19 के लिए किसी भी न्यूट्रलाइजिंग एंटीबॉडी टेस्ट को मंजूरी नहीं दी है.
इन जांचों में लाइव वायरस का इस्तेमाल होता है और इसलिए लैब में काम करने वाले लोगों को संक्रमण से बचाने के लिए विशेष लैब की जरूरत होती है.
प्लाक रिडक्शन न्यूट्रलाइजेशन टेस्ट (PRNT) का उपयोग आमतौर पर एंटीबॉडी को बेअसर करने की उपस्थिति की जांच के लिए किया जाता है.
इस टेस्ट में, रोगी के सीरम के साथ एक निश्चित मात्रा में वायरस मिलाया जाता है और घोल को एक माइक्रोटिटर प्लेट पर रखा जाता है जिसमें अतिसंवेदनशील कोशिकाएं (susceptible cells) होती हैं. फिर, प्लेट में बने प्लाक के आकार और संख्या को ध्यान में रखकर एंटीबॉडी के प्रभाव को मापा जाता है.
एक माइक्रोटिटर प्लेट में, सजीले टुकड़े स्पष्ट क्षेत्र होते हैं जहां वायरस ने कोशिकाओं को संक्रमित किया है और संतान पैदा किया है.
आमतौर पर, वायरस की एक विशिष्ट मात्रा के साथ विभिन्न ट्यूबों में मिलाने से पहले सीरम के नमूने को क्रमिक रूप से पतला (serial dilution) किया जाता है. यह पट्टिका क्षेत्रों (plaque areas) और पट्टिकाओं की संख्या (number of plates) की स्पष्ट रूप से पहचान करने में मदद करता है – यदि एंटीबॉडी की अपर्याप्त संख्या है, तो पट्टिकाएं विलीन (plates merge) हो सकती हैं और गिनना मुश्किल मुस्किल हो सकता है.
एंटीबॉडी के प्रकार देखने के लिए COVID-19 एंटीबॉडी परीक्षण के लिए
परीक्षण विशेष रूप से वायरस एंटीजन के खिलाफ आईजीजी या आईजीएम एंटीबॉडी की उपस्थिति की तलाश करते हैं. म्यूकोसल प्रतिरक्षा (mucosal immunity) निर्धारित करने के लिए IgA एंटीबॉडी की तलाश की जाती है. ये एंटीबॉडी रक्त और म्यूकोसल सतहों जैसे नाक में पाए जाते हैं. हालाँकि, COVID-19 में इस एंटीबॉडी का महत्व अभी तक निर्धारित नहीं किया गया है.
सार्स-सीओवी-2 एंटीजन – SARS-CoV-2 Antigen
अब तक, SARS-CoV-2 वायरस के स्पाइक प्रोटीन, वायरस के रिसेप्टर-बाइंडिंग डोमेन (receptor-binding domain) और बाहरी प्रोटीन कोट को एंटीजन के रूप में इस्तेमाल किया जाता है.
स्पाइक प्रोटीन (spike protein) वह है जो COVID-19 पैदा करने वाला वायरस स्वस्थ कोशिकाओं में बंधने और प्रवेश करने के लिए उपयोग करता है. रिसेप्टर-बाइंडिंग डोमेन (receptor-binding domain) स्पाइक प्रोटीन पर विशिष्ट साइट है जो मेजबान कोशिकाओं (host cells) की सतह पर ACE2 रिसेप्टर्स को बांधता है.
एंटीबॉडी परीक्षण के परिणाम – Antibody Test Results
यहां एंटीबॉडी परीक्षण के परिणाम का मतलब है.
आईजीएम एंटीबॉडी की उपस्थिति आमतौर पर हाल ही में संक्रमण की उपस्थिति को दर्शाती है और यह कि व्यक्ति की प्रतिरक्षा प्रणाली अभी भी सक्रिय रूप से वायरस के खिलाफ लड़ रही है। दूसरी ओर, आईजीजी एंटीबॉडी की उपस्थिति का मतलब है कि व्यक्ति को संक्रमण हुए कुछ समय हो गया है, अधिक परीक्षण से पता चलेगा कि वह अभी भी संक्रमित है या नहीं.
- सकारात्मक परिणाम :- यदि किसी व्यक्ति के रक्त में आईजीजी और आईजीएम दोनों एंटीबॉडी पाए जाते हैं, तो इसका मतलब है कि संक्रमण सक्रिय है और संभवतः 14 दिन पहले शुरू हुआ था. ऐसे मामलों में, व्यक्ति अभी भी संक्रमित है और उसे अलग करने की आवश्यकता है. यदि परीक्षण केवल आईजीएम एंटीबॉडी के लिए सकारात्मक वापस आता है, तो व्यक्ति को संक्रमण के 14 दिनों के भीतर दोबारा परीक्षण कराने का सुझाव दिया जाता है, यह देखने के लिए कि उनका शरीर अभी तक आईजीजी एंटीबॉडी का उत्पादन कर रहा है या नहीं.
- नकारात्मक परिणाम :- यदि कोई व्यक्ति दोनों एंटीबॉडी के लिए नकारात्मक परीक्षण करता है, तो इसका मतलब यह हो सकता है कि वह पहले वायरस के संपर्क में नहीं आया है या उसकी प्रतिरक्षा प्रणाली ने अभी तक वायरस के खिलाफ एंटीबॉडी बनाना शुरू नहीं किया है.
सीरोलॉजी परीक्षण सीमाएं – Serology Test Limitations
भले ही सीरोलॉजिकल टेस्ट, गुणात्मक (Qualitative) और मात्रात्मक (quantitative) दोनों परिणाम देते हैं – वे आपको बताते हैं कि क्या एंटीजन / एंटीबॉडी मौजूद हैं और कितनी मात्रा में हैं – और किसी व्यक्ति की प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया (immune response) की जाँच करने में प्रभावी हैं, इन परीक्षणों की निम्नलिखित सीमाएँ हैं :-
हमारी प्रतिरक्षा प्रणाली संक्रमण के खिलाफ विभिन्न प्रकार के एंटीबॉडी (पॉलीक्लोनल प्रतिक्रिया – polyclonal response) उत्पन्न करती है. तो, व्यक्ति A व्यक्ति B की तुलना में एक प्रकार के एंटीबॉडी क्लोन का अधिक उत्पादन कर सकता है, लेकिन फिर भी एक प्रभावी प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया होती है. इससे टेस्ट की अनिश्चितता बढ़ जाती है.
इसके अलावा, एक सूक्ष्म जीव (microbes) के विभिन्न उपभेद उक्त सूक्ष्म जीव के सीरोलॉजी को बदल सकते हैं – वे किस तरह के एंटीबॉडी से और कितनी मजबूती से जुड़ते हैं.
किसी व्यक्ति के शरीर में एंटीबॉडी बनने में कुछ समय लगता है। इसलिए, किसी बीमारी के निदान के लिए एंटीबॉडी टेस्ट का उपयोग नहीं किया जा सकता है.
(डिस्क्लेमर : लेख के इस भाग में दी गई जानकारी केवल शैक्षिक उद्देश्यों के लिए है। सटीक निदान करने के लिए सभी परिणामों को रोगी के डेटा के साथ चिकित्सकीय रूप से सहसंबद्ध होना चाहिए।)
संदर्भ
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- World Health Organization [Internet]. Geneva (SUI): World Health Organization; Guidelines for Plaque reduction neutralization testing of human antibodies to dengue viruses
- UCLA health [Internet]. University of California. Oakland. California. US; What is Antibody (Serology) Testing
- AIDS Info [Internet]. National Institute of Health. U.S. Department of Health and Human Services. Maryland. US; Serologic Test
